李記生物?李記生物的活性氧檢測試劑盒(Meilun Reactive Oxygen Species Assay Kit)采用DCFH-DA作為熒光染料,通過檢測熒光強度變化,量化細胞內ROS水平。DCFH-DA可自由穿過細胞膜,進入細胞后,被酯酶水解生成DCFH。在ROS存在下,DCFH被氧化為綠色熒光DCF,熒光強度與細胞內ROS水平正相關。那么,李記生物?一起來了解一下吧。
解決細胞凍存問題,李記生物新品來啦!本系列新品包括無血清細胞凍存液(增強型)、藥輔級細胞凍存液(非程序降溫)、無血清細胞凍存液(無DMSO),適用于多種細胞的冷凍保存。實驗數據顯示,新品在提高細胞復蘇活率和活力、保護細胞免受損傷方面表現出色,加速實驗進展,實驗結果信心百倍。
新品活動亮點如下:
1. 零元享試用:30mL快速細胞凍存液(無血清、無蛋白)、8mL無血清細胞凍存液(增強型)或1mL CCK-8試用裝(共300份,每個課題組限領1次,活動期止或送完為止)。
2. 買就送CCK-8:活動期間單次購買指定細胞凍存液,即可領取5mL CCK-8(不限次數,具體產品詳情見下表)。
3. 李記送零食:隨機抽取20位幸運鵝,送出三只松鼠精品堅果禮盒或茶顏悅色方罐茶(2盒裝)。
參與方式:點擊下方小程序參與,活動范圍為全國生物相關終端客戶,開獎時間為2024年3月7日13:00,領取方式請3個工作日內聯系相關業務員進行兌換。注意事項:關注微信公眾號后參與活動,所有獎品隨機發出,活動最終解釋權歸和元李記所有。
產品描述:RIPA裂解液,一種用于動物組織或細胞快速裂解的工具,利用離子型與非離子型去垢劑共同作用,有效釋放蛋白質,適用于細胞膜、胞漿、胞核等部分的裂解。李記生物的中等強度RIPA裂解液不含PMSF成分,適用于PAGE、Western Blotting和免疫沉淀研究。
訂購信息:常溫運輸,4℃保存,有效期12個月。產品配方包括25mM Tris?HCl,150mM NaCl,1% NP-40,0.5% sodium deoxycholate,pH 7.6。
使用方法:對于貼壁細胞,首先加入適量裂解液,搭配蛋白酶抑制劑或PMSF(終濃度為1mM)。去除細胞培養液,用冷PBS洗滌兩次。按照6孔板每孔加入150-200μL裂解液的比例,必要時增加至250-300μL。使用槍吹打均勻,冰上放置10分鐘,每2分鐘吹打一次。收集上清液。對于懸浮細胞,收集細胞,加入裂解液,用槍吹打并劇烈震蕩,冰上放置10分鐘,每2分鐘震蕩一次。離心5分鐘,收集上清液。組織樣品則需剪碎,按照每100mg組織加入1mL裂解液,冰上勻漿,離心取上清。
注意事項:僅限科學實驗研究,不得用于臨床診斷或治療。如需檢測磷酸化蛋白,需額外添加磷酸酶抑制劑。
Protein A/G磁珠試劑盒是一種高效工具,用于在生物研究中分離和純化抗體。其核心是含有重組蛋白A/G的磁性珠,能有效結合血清、細胞上清或組織提取物中的IgG,便于免疫沉淀和共同免疫沉淀實驗。
為了確保實驗順利進行,以下是使用方法的簡要概述:
貼壁細胞樣本處理:移除培養基,用PBS清洗,收集細胞后,加入IP Lysis/Wash Buffer和抑制劑,離心后收集上清,或冷凍保存。
懸浮細胞樣本處理:收集細胞、洗滌、重懸后,用IP Lysis/Wash Buffer處理并加入抑制劑,離心后收集上清。
血清樣品處理:稀釋血清至50-150 μg/mL,備用或冷凍保存。
免疫復合物制備:將抗體和細胞裂解液混合,室溫或4℃孵育后進行免疫沉淀。
免疫沉淀過程:加入磁珠、洗滌、孵育和洗脫,最后分離磁珠并收集目的抗原。
在使用時,請注意產品僅限于科研用途,避免高速離心、干燥或冷凍磁珠,以及根據抗體-抗原體系進行實驗參數優化。為了最佳效果,推薦使用李記生物的相關產品和配套試劑,如1X PBS、Western/IP細胞裂解液和蛋白示蹤上樣緩沖液。
細胞凍存液在細胞生物學與藥物研發中扮演重要角色,面對種類繁多的細胞凍存液,選擇合適的類型成為關鍵。本文將從細胞凍存液的分類、應用場景、使用效果等角度進行解析,以期為細胞凍存液的選擇提供參考。
一、細胞凍存液的分類
1. 按成分劃分:細胞凍存液主要分為滲透性和非滲透性兩種類型。滲透性保護劑如甘油、DMSO、乙二醇等,可快速滲入細胞,降低細胞內外溶液中的電解質濃度,避免細胞脫水和冰晶形成。而非滲透性保護劑,如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、葡聚糖、白蛋白及羥乙基淀粉(HES),通過降低細胞外自由水含量,減少冰晶形成,同時也降低了溶液中電解質濃度,減輕溶質損傷。DMSO作為一種滲透性細胞凍存保護劑的代表,因其快速降低細胞內外電解質濃度、減少冰晶產生的特性,被廣泛使用。常規的細胞凍存液中,DMSO含量通常為10%。
2. 是否含血清:細胞凍存液含血清可以提供細胞生長環境的保護,但血清中的動物源成分可能導致細胞污染、批間穩定性問題。多家公司已開發出不含血清的細胞凍存液,這些產品采用不含血清及動物來源性蛋白的配方,減少了病毒、霉菌和支原體等污染的風險。含血清的細胞凍存液通常采用程序降溫,以避免血清中的大量蛋白和細胞因子在快速降溫時產生沉淀。
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以上就是李記生物的全部內容,活性氧(ROS)在細胞生理和病理過程中扮演關鍵角色,李記生物的活性氧檢測試劑盒提供了一種基于熒光染料DCFH-DA的檢測方法,能夠定量檢測細胞內ROS水平。DCFH-DA在細胞內酯酶作用下生成DCFH,后者不易穿過細胞膜,從而標記細胞內ROS。在ROS存在下,DCFH被氧化為熒光物質DCF,其熒光強度與細胞內ROS水平呈正比。內容來源于互聯網,信息真偽需自行辨別。如有侵權請聯系刪除。