微生物接種?一、微生物接種的方法 1、劃線接種:將培養(yǎng)物中混合在一起的多種菌種分開,讓菌種分散生長(zhǎng),形成單個(gè)的菌落,常見的方法有分段劃線法和連續(xù)劃線法。2、三點(diǎn)接種:將培養(yǎng)物中的菌種移動(dòng)到平板面上,擺成一個(gè)等邊三角形,讓三點(diǎn)上的菌種各自形成菌落,方便觀察,常使用于研究霉菌的形態(tài)。3、那么,微生物接種?一起來(lái)了解一下吧。
接種常見方法有:平板劃線接種法、斜面接種法、傾注培養(yǎng)法、穿刺接種法、液體接種法。
一、平板劃線分離法
平板劃線分離法:是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落,通常把這種單菌落當(dāng)作待分離微生物的純種。
二、斜面接種法
該法主要用于單個(gè)菌落的純培養(yǎng)、保存菌種或觀察細(xì)菌的某些特性。
三、穿刺接種法
穿刺培養(yǎng),是指將帶有欲培養(yǎng)微生物的接種針深插至半固體培養(yǎng)基(瓊脂含量0.2%?1.0%)中接種,并進(jìn)行微生物固體深層培養(yǎng)的一種方法,主要用于厭氧或兼性厭氧微生物的培養(yǎng)。
四、液體接種法
液體培養(yǎng),是指將微生物直接接種于液體培養(yǎng)基中,并不斷振蕩或攪拌,使微生物均勻地在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖的一種培養(yǎng)方法。液體培養(yǎng)適用于好氧微生物和植物組織培養(yǎng),以迅速得到大量繁殖體為目的。
五、涂布接種法
微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的一種操作方法。由于將含菌材料現(xiàn)加到還較燙的培養(yǎng)基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡,而且采用稀釋倒平臺(tái)法也會(huì)使一些嚴(yán)格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長(zhǎng),因此在微生物學(xué)研究中更常用的純種分離方法是涂布平板法。
微生物接種指的是將微生物移動(dòng)到適合它生長(zhǎng)繁殖的培養(yǎng)基上,常見的微生物接種方法包括:劃線接種、三點(diǎn)接種、穿刺接種、澆混接種、涂布接種、液體接種、注射接種以及活體接種這8種。
一、微生物接種的方法
1、劃線接種:將培養(yǎng)物中混合在一起的多種菌種分開,讓菌種分散生長(zhǎng),形成單個(gè)的菌落,常見的方法有分段劃線法和連續(xù)劃線法。
2、三點(diǎn)接種:將培養(yǎng)物中的菌種移動(dòng)到平板面上,擺成一個(gè)等邊三角形,讓三點(diǎn)上的菌種各自形成菌落,方便觀察,常使用于研究霉菌的形態(tài)。
3、穿刺接種:用接種針蘸取菌種,沿著半固體培養(yǎng)基的中心向管底呈直線穿刺下去,常適用于保藏厭氧菌種。
4、澆混接種:將微生物放至培養(yǎng)皿中,倒入溫度為45℃的固體培養(yǎng)基搖勻,等凝固后,放至合適的環(huán)境下培養(yǎng)。
5、涂布接種:倒好平板,等到平板凝固后,等涂布棒在平板表面左右涂抹滾動(dòng),讓菌液均勻分布在平板上。
6、液體接種:將固體培養(yǎng)基中的菌種倒入液體培養(yǎng)基中,或者使用移液管將菌種從液體培養(yǎng)基中移動(dòng)到另一個(gè)液體培養(yǎng)基中。
7、注射接種:將微生物用注射的方法移至活體內(nèi),常見的有疫苗預(yù)防接種。
8、活體接種:將病毒移接到活體內(nèi)或者活組織內(nèi)培養(yǎng),因?yàn)椴《局荒艽婊钣诨铙w內(nèi)才能生存。
接種
將微生物接到適于它生長(zhǎng)繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過(guò)程叫做接種.
1、接種工具和方法
在實(shí)驗(yàn)室或工廠實(shí)踐中,用得最多的接種工具是接種環(huán)、接種針.由于接種要求或方法的不同,接種針的針尖部常做成不同的形狀,有刀形、耙形等之分.有時(shí)滴管、吸管也可作為接種工具進(jìn)行液體接種.在固體培養(yǎng)基表面要將菌液均勻涂布時(shí),需要用到涂布棒.
常用的接種方法有以下幾種:
1)劃線接種 這是最常用的接種方法.即在固體培養(yǎng)基表面作來(lái)回直線形的移動(dòng),就可達(dá)到接種的作用.常用的接種工具有接種環(huán),接種針等.在斜面接種和平板劃線中就常用此法.
2)三點(diǎn)接種 在研究霉菌形態(tài)時(shí)常用此法.此法即把少量的微生物接種在平板表面上,成等邊三角形的三點(diǎn),讓它各自獨(dú)立形成菌落后,來(lái)觀察、研究它們的形態(tài).除三點(diǎn)外,也有一點(diǎn)或多點(diǎn)進(jìn)行接種的.
3)穿刺接種 在保藏厭氧菌種或研究微生物的動(dòng)力時(shí)常采用此法.做穿刺接種時(shí),用的接種工具是接種針.用的培養(yǎng)基一般是半固體培養(yǎng)基.它的做法是:用接種針蘸取少量的菌種,沿半固體培養(yǎng)基中心向管底作直線穿刺,如某細(xì)菌具有鞭毛而能運(yùn)動(dòng),則在穿刺線周圍能夠生長(zhǎng).
4)澆混接種 該法是將待接的微生物先放入培養(yǎng)皿中,然后再倒入冷卻至45°C左右的固體培養(yǎng)基,迅速輕輕搖勻,這樣菌液就達(dá)到稀釋的目的.待平板凝固之后,置合適溫度下培養(yǎng),就可長(zhǎng)出單個(gè)的微生物菌落.
5)涂布接種 與澆混接種略有不同,就是先倒好平板,讓其凝固,然后再將菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作來(lái)回左右的涂布,讓菌液均勻分布,就可長(zhǎng)出單個(gè)的微生物的菌落.
6)液體接種 從固體培養(yǎng)基中將菌洗下,倒入液體培養(yǎng)基中,或者從液體培養(yǎng)物中,用移液管將菌液接至液體培養(yǎng)基中,或從液體培養(yǎng)物中將菌液移至固體培養(yǎng)基中,都可稱為液體接種.
7)注射接種 該法是用注射的方法將待接的微生物轉(zhuǎn)接至活的生物體內(nèi),如人或其它動(dòng)物中,常見的疫苗預(yù)防接種,就是用注射接種,接入人體,來(lái)預(yù)防某些疾病.
8)活體接種 活體接種是專門用于培養(yǎng)病毒或其它病原微生物的一種方法,因?yàn)椴《颈仨毥臃N于活的生物體內(nèi)才能生長(zhǎng)繁殖.所用的活體可以是整個(gè)動(dòng)物;也可以是某個(gè)離體活組織,例如猴腎等;也可以是發(fā)育的雞胚.接種的方式是注射,也可以是拌料喂養(yǎng).
實(shí)驗(yàn)室常用方法
(一)斜面接種:由已長(zhǎng)好微生物的斜面中挑取少量菌種接種至另一空白斜面培養(yǎng)基上.
(1)接種前用記號(hào)筆在距試管口2~3cm位置上,注明菌名、接種日期等.
(2)將試管放于手掌中,并用手指夾住,使兩支試管呈“V”字形.
(3)用火焰將接種環(huán)燒紅,然后將接種環(huán)來(lái)回通過(guò)火焰數(shù)次.
(4)用小指、無(wú)名指和手掌拔下試管塞,并持于手中.
(5)將試管口在火焰上微燒一周.
(6)將燒過(guò)的接種環(huán)伸入菌種管內(nèi),先將環(huán)接觸一下沒(méi)有長(zhǎng)菌的培養(yǎng)基部分,使其冷卻,以免燙死菌體,然后用環(huán)在菌苔上輕輕地接觸,刮下少許培養(yǎng)物,并將接種環(huán)慢慢 的從試管中抽出,并迅速地伸入另一試管中,在斜面上劃線(波浪或直線),使菌體沾附在培養(yǎng)基上.
(7)將接種環(huán)抽出,灼燒管口.
(8)塞上棉塞.
(9)將接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌.
(二)液體接種:由斜面菌種接種在液體培養(yǎng)基中
(1)接種前用記號(hào)筆在距試管口2~3cm位置上,注明菌名、接種日期等.
(2)將試管放于手掌中,并用手指夾住,使兩支試管呈“V”字形.
(3)用火焰將接種環(huán)燒紅,然后將接種環(huán)來(lái)回通過(guò)火焰數(shù)次.
(4)用小指、無(wú)名指和手掌拔下試管塞,并持于手中.
(5)將試管口在火焰上微燒一周.
(6)參照?qǐng)D(7-1)
(7)將接種環(huán)抽出,灼燒管口.
(8)塞上棉塞.
(9)將接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌.
接種常見方法有:平板劃線接種法、斜面接種法、傾注培養(yǎng)法、穿刺接種法、液體接種法。
一、平板劃線分離法
平板劃線分離法:是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落,通常把這種單菌落當(dāng)作待分離微生物的純種。
二、斜面接種法
該法主要用于單個(gè)菌落的純培養(yǎng)、保存菌種或觀察細(xì)菌的某些特性。
三、穿刺接種法
穿刺培養(yǎng),是指將帶有欲培養(yǎng)微生物的接種針深插至半固體培養(yǎng)基(瓊脂含量0.2%?1.0%)中接種,并進(jìn)行微生物固體深層培養(yǎng)的一種方法,主要用于厭氧或兼性厭氧微生物的培養(yǎng)。
四、液體接種法
液體培養(yǎng),是指將微生物直接接種于液體培養(yǎng)基中,并不斷振蕩或攪拌,使微生物均勻地在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖的一種培養(yǎng)方法。液體培養(yǎng)適用于好氧微生物和植物組織培養(yǎng),以迅速得到大量繁殖體為目的。
五、涂布接種法
微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的一種操作方法。由于將含菌材料現(xiàn)加到還較燙的培養(yǎng)基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡,而且采用稀釋倒平臺(tái)法也會(huì)使一些嚴(yán)格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長(zhǎng),因此在微生物學(xué)研究中更常用的純種分離方法是涂布平板法。
一、平板劃線接種法(分離培養(yǎng)法)
這種方式是將細(xì)菌分離培養(yǎng)的常用技術(shù),其目的是將混有多種細(xì)菌的培養(yǎng)物,或標(biāo)本中不同的細(xì)菌(病原菌與非病原菌)使其分散生長(zhǎng),形成單個(gè)菌落或分離出單一菌株,便于識(shí)別鑒定。平板劃線接種方法較多,其中以分段劃線法與曲線劃線法較為常用。
二、斜面接種法
此法主要用于移種純菌,使其增殖后用于鑒定或保存菌種。通常是從平板培養(yǎng)物上挑取某一單獨(dú)菌落或者從一支已長(zhǎng)好的斜面菌種,移種至斜面培養(yǎng)基上,接種步驟如下(以從已長(zhǎng)好的斜面菌種轉(zhuǎn)接為例)
三、傾注培養(yǎng)法
本法用于飼料中細(xì)菌、霉菌的計(jì)數(shù)。方法是取原始樣品或經(jīng)適當(dāng)稀釋的(通常是10-1~10-5
稀釋)液體1mL,置于直徑9cm無(wú)菌平皿內(nèi),傾入已融化并冷至50℃左右的培養(yǎng)基約13~15mL
,立即混勻,待凝固后倒置,于一定溫度下培養(yǎng)一定小時(shí),作菌落計(jì)數(shù)。
四、穿刺接種法
此法多用于雙糖、半固體、明膠等培養(yǎng)基的接種,方法與斜面接種類似。用接種針挑取菌落或菌液少許,由培養(yǎng)基表面中央直刺至管底(若為三糖鐵并在斜面加以涂布),然后沿穿刺線拔出接種針(注:接種半固體看動(dòng)力者不穿刺到底)。
五、液體接種法
此法多用于單糖發(fā)酵試驗(yàn)等,接種方法與斜面接種方法基本相同。
以上就是微生物接種的全部?jī)?nèi)容,微生物接種的四種方法包括:平板劃線接種法:簡(jiǎn)介:是將細(xì)菌分離培養(yǎng)的常用技術(shù)。目的:使混有多種細(xì)菌的培養(yǎng)物形成單個(gè)菌落或分離出單一菌株,便于后續(xù)的識(shí)別和鑒定。斜面接種法:簡(jiǎn)介:主要用于移種純菌。目的:使純菌增殖后用于進(jìn)一步的鑒定或保存菌種。傾注培養(yǎng)法:簡(jiǎn)介:主要用于飼料等樣品中的細(xì)菌、內(nèi)容來(lái)源于互聯(lián)網(wǎng),信息真?zhèn)涡枳孕斜鎰e。如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系刪除。