微生物分離純化的方法?1、篩選法 篩選法是一種常用的微生物分離純化方法,它利用不同微生物的生理生化特性,通過(guò)對(duì)不同培養(yǎng)基的篩選,選擇出目標(biāo)微生物。這種方法適用于微生物數(shù)量較多的情況下,可以快速篩選出目標(biāo)微生物。2、純培養(yǎng)法 純培養(yǎng)法是一種將目標(biāo)微生物從混合菌群中分離出來(lái)的方法。那么,微生物分離純化的方法?一起來(lái)了解一下吧。
1. 劃線平板接種法:這種方法使用接種環(huán)在無(wú)菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線。隨著劃線次數(shù)的增加,微生物細(xì)胞數(shù)量將減少并逐步分散開(kāi)來(lái)。如果劃線適宜,微生物能一一分散,經(jīng)培養(yǎng)后,在平板表面得到單菌落。該方法主要用于細(xì)菌分離和純化。
2. 涂布平板法:這種方法先將待分離的材料用無(wú)菌水作一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí),可以獲得單個(gè)細(xì)菌形成的菌落。該方法主要用于活菌計(jì)數(shù)和觀察菌落特征。
3. 稀釋倒平板法(澆注平板法):這種方法先將待分離的材料用無(wú)菌水作一系列的梯度稀釋,然后分別取不同稀釋液少許,與已熔化并冷卻至45℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合,搖勻后,傾入滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿中,待瓊脂凝固后,制成可能含菌的瓊脂平板。如果稀釋得當(dāng),在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個(gè)菌落。該方法主要用于微生物的分離和純化。
1.富集培養(yǎng),取約一克樣品,加入裝有富集培養(yǎng)基的三角瓶中置于80—90攝氏度水域加熱10到20分鐘然后經(jīng)三十?dāng)z氏度振蕩培養(yǎng)
2初篩平板選擇處理將培養(yǎng)液再經(jīng)一次熱處理,適當(dāng)稀釋后,取0.1毫升涂布在選擇培養(yǎng)基上30度培養(yǎng)
主要有
1、稀釋倒平板法
首先把微生物懸液作一系列的稀釋(如1:10、1:100、1:1000、1:10000),然后分別取不同稀釋液少許,與已熔化并冷卻至50℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合,搖勻后,傾入滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿中,待瓊脂凝固后制成可能含菌的瓊脂平板,保溫培養(yǎng)一定時(shí)間即可出現(xiàn)菌落。如果稀釋得當(dāng),在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個(gè)菌落,這個(gè)菌落可能就是由一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞繁殖形成的。隨后挑取該單個(gè)菌落,或重復(fù)以上操作數(shù)次,便可得到純培養(yǎng)。
2.、稀釋涂布平板法
將已熔化的培養(yǎng)基倒入無(wú)菌平皿,制成無(wú)菌平板,冷卻凝固后,將一定量的微生物懸液滴加在平板表面,再用無(wú)菌玻璃涂棒將菌液均勻分散至整個(gè)平板表面,經(jīng)培養(yǎng)后挑取單個(gè)菌落。
3、平板劃線法
將微生物樣品在固體培養(yǎng)基表面多次作“由點(diǎn)到線”稀釋而達(dá)到分離。
4、稀釋搖管法
先將一系列盛無(wú)菌瓊脂培養(yǎng)基的試管加熱使瓊脂熔化后冷卻并保持在50℃左右,將待分離的材料用這些試管進(jìn)行梯度稀釋,試管迅速搖動(dòng)均勻,冷凝后,在瓊脂柱表面傾倒一層滅菌液體石蠟和固體石蠟的混合物,將培養(yǎng)基和空氣隔開(kāi)。
主要有1.劃線法
2.倒平板法
3.涂布法
根據(jù)分離的菌種選擇不同的培養(yǎng)基
稀釋混合倒平板法、稀釋涂布平板法、平板劃線分離法、稀釋搖管法、液體培養(yǎng)基分離法、單細(xì)胞分離法、選擇培養(yǎng)分離法等。其中前三種方法最為常用,不需要特殊的儀器設(shè)備, 分離純化效果好。
從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過(guò)程稱為微生物分離與純化。在分子生物學(xué)的研究及應(yīng)用中,不僅需要通過(guò)分離
從混雜微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過(guò)程稱為微生物分離與純化。在分子生物學(xué)的研究及應(yīng)用中,不僅需要通過(guò)分離純化技術(shù)從混雜的天然微生物群中分離出特定的微生物,而且還必須隨時(shí)注意保持微生物純培養(yǎng)物的“純潔”,防止其他微生物的混入。
1、用固體培養(yǎng)基分離和純化
單個(gè)微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長(zhǎng)群體,稱為菌落。當(dāng)固體培養(yǎng)基表面眾多菌落連成一片時(shí),便成為菌苔。不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長(zhǎng)形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征,可以成為對(duì)該微生物進(jìn)行分類、鑒定的重要依據(jù)。大多數(shù)細(xì)菌、酵母菌、以及許多真菌和單細(xì)胞藻類能在固體培養(yǎng)基上形成孤立的菌落,采用適宜的平板分離法很容易得到純培養(yǎng)。
1、先根據(jù)目的菌株的生長(zhǎng)特性從環(huán)境中采集樣品
2、將樣品加入無(wú)菌水中,振蕩使菌均勻分布
3、采用梯度稀釋法,選取合適的梯度值于平板上培養(yǎng)
4、挑取目的菌進(jìn)行平板劃線分離即可
以上就是微生物分離純化的方法的全部?jī)?nèi)容,分離:稀釋倒平皿法 平板劃線法 單細(xì)胞挑取法 利用選擇培養(yǎng)基分離法 純化:1.若是你不知道你所要純化的微生物的特征,最簡(jiǎn)單的不知道它的菌落特征和形態(tài)大小,那現(xiàn)根據(jù)你要分離菌的特性,找適合的初篩培養(yǎng)基,找到你要純化的菌。如纖維素菌,你在培養(yǎng)基中加纖維素粉或CMC-Na作碳源。