食品微生物檢驗(yàn)技術(shù)，食品微生物檢測(cè)技術(shù)有哪些

生物
2023-06-03

目錄
pcr技術(shù)在微生物檢測(cè)中的應(yīng)用
食品微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目
食品微生物檢測(cè)技術(shù)有哪些
女生做微生物檢測(cè)有發(fā)展嗎
食品微生物實(shí)驗(yàn)室日常工作

pcr技術(shù)在微生物檢測(cè)中的應(yīng)用

法律分析：食品、食品添加劑、食品相關(guān)產(chǎn)品中致病性微生物等污染物質(zhì)以及其他危體健康的物質(zhì)含量不可超過食品安全標(biāo)準(zhǔn)。

法律依據(jù)：《中華人民共和國食品衛(wèi)生法》第三十四條禁止生產(chǎn)經(jīng)營下列食品、食品添加劑、食品相關(guān)產(chǎn)品：（一）用非食品原料生產(chǎn)的食品或者添加食品添加劑以外的化學(xué)物質(zhì)和其他可能危體健康物質(zhì)的食品，或者用回收食品作為原料生產(chǎn)的食品；（二）致病性微生物，農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、生物毒雹謹(jǐn)素、重金屬等污染物質(zhì)以及其他危體健康的物質(zhì)含量超過食品安全標(biāo)準(zhǔn)限量的食品、食品添加劑、食品相關(guān)產(chǎn)品備穗；（三）用超過保質(zhì)期的食品原料、食品添加劑生產(chǎn)的食品、食品添加劑；（四）超范圍、超限量使用食品添加劑的食品；（五）營養(yǎng)成分不符合食品安全標(biāo)準(zhǔn)的專供嬰幼兒和其他特定人群的主輔食品；（六）腐敗變質(zhì)、油脂酸敗、霉變生蟲、污穢不潔、混有異物、摻假摻雜或者感官性狀異常的食品、食品添加劑；（七）病死、毒死或者死因不明的禽、畜、獸、水產(chǎn)動(dòng)物肉類及其制品；（八）未按規(guī)定進(jìn)行檢疫或者檢疫不合格的肉類，或者未經(jīng)檢驗(yàn)或者檢驗(yàn)不合格的肉類制品；（九）被包裝材料、容器、運(yùn)輸?shù)任廴镜氖称?、食品添加劑；（十）?biāo)注虛假生產(chǎn)日期、保質(zhì)期或者超過保質(zhì)期的食品、食品添加劑；（十一）無標(biāo)簽的預(yù)包裝食品、食品添加劑源滾基；（十二）國家為防病等特殊需要明令禁止生產(chǎn)經(jīng)營的食品；（十三）其他不符合法律、法規(guī)或者食品安全標(biāo)準(zhǔn)的食品、食品添加劑、食品相關(guān)產(chǎn)品。

食品微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目

《仔鎮(zhèn)高職高專賀戚扮十一五規(guī)劃教材·食品類系列·食品微生物檢驗(yàn)技術(shù)》是高職高?！笆晃濉币?guī)劃教材女食品類系列之一。教材注重培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力和實(shí)踐創(chuàng)新能力，從事食品衛(wèi)生檢驗(yàn)工作的技術(shù)人員通過禪灶《高職高專十一五規(guī)劃教材·食品類系列·食品微生物檢驗(yàn)技術(shù)》也能在較短時(shí)間內(nèi)達(dá)到學(xué)以致用。

食品微生物檢測(cè)技術(shù)有哪些

食品微生物快速檢測(cè)技術(shù)有哪些

我國每年帆棗發(fā)生的食源性疾病暴發(fā)事件約數(shù)十萬起，發(fā)病數(shù)約千萬人次。此類疾病發(fā)病率極快，若不能及時(shí)確診、對(duì)癥治療，后果將非常嚴(yán)重。此外，一些由自然災(zāi)害、環(huán)境污染等突發(fā)事件引發(fā)的食品安全突發(fā)事件，也需要及時(shí)、快速、準(zhǔn)確地給出結(jié)果，為應(yīng)急處理等工作提供科學(xué)依據(jù)。要保證從農(nóng)田到餐桌的食品安全，除了對(duì)生產(chǎn)產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè)之外，從種植基地、到眾多流通環(huán)節(jié)的整個(gè)產(chǎn)業(yè)鏈都需要進(jìn)行質(zhì)量保障，比如大型農(nóng)貿(mào)批發(fā)市場(chǎng)、超市者轎察、甚至省級(jí)高速處等等，在這樣的需求下，快速檢測(cè)也將有很大的應(yīng)用空間。綜合來看，以試劑盒、ELISA、PCR、納米生物技術(shù)、生物傳感技術(shù)、便攜式分析儀器等為代表的快速檢測(cè)、移動(dòng)檢測(cè)技術(shù)在中國食品安全保障體系中首茄必將扮演更加重要的角色。

但值得一提的是，目前快檢技術(shù)的應(yīng)用仍存在一些問題，如準(zhǔn)確度、檢出限、精密度、重復(fù)性、再現(xiàn)性、抗干擾性等。由于現(xiàn)在的檢測(cè)多是微量或痕量檢測(cè)，對(duì)儀器和人員的要求都很高，檢測(cè)的前處理要求也高，但是快速檢測(cè)技術(shù)作為準(zhǔn)確定量檢測(cè)的前期輔助篩查，可以排除一些不必要的檢測(cè)，為后期定量檢測(cè)節(jié)省大量的人力和物力，提高檢測(cè)速度。

女生做微生物檢測(cè)有發(fā)展嗎

2013年第1期廣東化工第40卷總第243期· 75 ·

食品微生物檢測(cè)新技術(shù)及發(fā)展趨勢(shì)

(通標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)有限公司廈門分公司食品部，福建廈門 361101)

[摘要]文章就近年來出現(xiàn)的ATP 生物發(fā)光法、免疫磁性分離技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)、核酸探針等技術(shù)在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)行綜述，并對(duì)這些技術(shù)的發(fā)展前景進(jìn)行探討。

[關(guān)鍵詞]食品微生物；發(fā)展趨勢(shì)；檢測(cè)

[中圖分類號(hào)]TQ053 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]1007-1865(2013)01-0075-02

劉翔軍

New Technologies and Development Trend of Food Microbiological Testing

Liu Xiangjun

(Xiamen Food Division SGS-CSTC Standards Technical Services Co., Ltd., Xiamen 361101, China)

Abstract: The paper summarizes the ATP bioluminescence, Immuno-magnetic capture, flow cytometry, nucleic acid probe technology in the application of food microbiological testing, and the prospect of the development of these technologies are discussed.

Keywords: food microbiological；development trend；testing

目前，微生物污染造成的食源性疾病仍是世界食品安全中最突出的問題。加工食品所含菌的種類、數(shù)量，常隨原料的生產(chǎn)環(huán)境及細(xì)菌學(xué)質(zhì)量、工廠環(huán)境與操作人員的衛(wèi)生及處理狀況、制品貯運(yùn)狀況等而異。由于食品微生物污染的廣泛發(fā)生，嚴(yán)重影響人民的健康，因此食品微生物檢驗(yàn)工作對(duì)評(píng)價(jià)食品衛(wèi)生質(zhì)量，保證消費(fèi)者飲食衛(wèi)生有著極為重要的作用。傳統(tǒng)的食品微生物檢測(cè)通過不同微生物在某種培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖，所形成的菌落特征有很大差異，而同一種微生物在一定條件下，培養(yǎng)特征卻有一定穩(wěn)定性，以此可以對(duì)不同微生物初步篩選，再通過鏡檢、生化鑒定、血清學(xué)驗(yàn)證等技術(shù)鑒別各種微生物。傳統(tǒng)檢測(cè)方法的步驟繁瑣、檢測(cè)周期長(zhǎng)、成本高等缺點(diǎn)。因此，研究靈敏度更高、特異性更強(qiáng)、簡(jiǎn)便快捷的食品安全檢測(cè)技術(shù)和方法，建立和完善食品安全微生物檢測(cè)技術(shù)和體系迫在眉睫。文章將介紹幾種食品微生物檢驗(yàn)的新技術(shù)及其發(fā)展趨勢(shì)。

ATP 再與熒光素-熒光素酶生物發(fā)光劑作用，用發(fā)光檢測(cè)儀測(cè)定ATP 與發(fā)光劑反應(yīng)的生物發(fā)光量。通過預(yù)先測(cè)定的ATP 標(biāo)準(zhǔn)曲線坦余，得出活菌的總ATP 量，即可得出細(xì)菌總數(shù)。 1.3 ATP生物發(fā)光法檢測(cè)設(shè)備

市場(chǎng)上已出現(xiàn)了大量的ATP 檢測(cè)儀。從全自動(dòng)儀器到小型、便攜式儀器都有。例如，Millipore 公司的Microstar 、BevScreen 、SteriScreen ；美國Maxwell 公司的LumiMax-c(96孔板型) ；Berthold Detection Systems公司的管式、板式化學(xué)發(fā)光儀；Promega 公司的GloMax TM 發(fā)光檢測(cè)儀及相應(yīng)的檢測(cè)試劑盒等。其中尤以Millipore 公司的Microstar-RMDS 系列(rapid microbial detection system)應(yīng)用最為廣泛。RMDS 的結(jié)構(gòu)組成汪信納包括：樣品過濾膜、ATP-生物發(fā)光化學(xué)反應(yīng)器、熒光增強(qiáng)及數(shù)據(jù)處理。將待測(cè)樣品用650孔疏水分隔的過濾膜(孔徑0.45 μm 、直徑47 mm)過濾，而后將膜溫育一段時(shí)間(檢測(cè)酵母時(shí)可不經(jīng)溫育直接檢測(cè)) ，再將膜從培養(yǎng)皿上分離后烘干。接著向膜上噴灑ATP 萃取劑(其中含有乙醇) ，再烘干后，向膜上噴灑熒光素-熒光困沒素酶。理論上說，每個(gè)微菌落都會(huì)形成一個(gè)熒光斑，RMDS 的熒光增強(qiáng)則將每個(gè)微菌落發(fā)生的熒光加以成千倍的增強(qiáng)并用偶聯(lián)的照相機(jī)記錄下熒光圖像。而后自動(dòng)圖像處理器會(huì)分析熒光強(qiáng)度等數(shù)據(jù)并由此計(jì)算出微生物的數(shù)量。RMDS 附帶的會(huì)記錄圖像和數(shù)據(jù)，存檔以待進(jìn)一步的分析[4]。

1.4 ATP生物發(fā)光法的發(fā)展趨勢(shì)

以下幾點(diǎn)是ATP 生物發(fā)光法可以嘗試的發(fā)展方向：(1)將革蘭氏染色法與生物發(fā)光法結(jié)合起來，確定細(xì)菌的革蘭氏陽性陰性。不同的菌種有特定的DNA 序列，(2)將生物發(fā)光法與DNA 分子識(shí)別結(jié)合起來，不僅可以檢測(cè)出菌落總數(shù)，而且可以鑒定菌種；(3)發(fā)光檢測(cè)儀的靈敏度的進(jìn)一步提高，重復(fù)性的保證等。(4)免疫磁分離技術(shù)應(yīng)用于ATP 生物發(fā)光法，二者結(jié)合使靈敏度大大提高。

1 ATP 生物發(fā)光法在微生物檢測(cè)中的應(yīng)用

ATP(adenosine triphosphate，三磷酸腺苷又稱腺苷三磷酸) 生物發(fā)光法以其簡(jiǎn)便、快速、高靈敏度等特點(diǎn)，具有其它微生物快速檢測(cè)方法不可比擬的優(yōu)勢(shì)，現(xiàn)已應(yīng)用于食品工業(yè)的眾多領(lǐng)域。例如，用生物發(fā)光法測(cè)定肉類食品中細(xì)菌污染情況；以及乳制品中乳酸菌的測(cè)定、啤酒中菌落總數(shù)測(cè)定、調(diào)味品及脫水蔬菜的細(xì)菌學(xué)測(cè)定等。

1.1 ATP生物發(fā)光法原理

ATP 是高能磷酸化合物的典型代表。ATP 是由一分子腺嘌呤、一分子核糖和三個(gè)相連的磷酸基團(tuán)構(gòu)成的核苷酸。ATP 有兩個(gè)高能磷酸鍵，一個(gè)低能磷酸鍵。每個(gè)高能磷酸鍵水解時(shí)，可產(chǎn)生30.54 kJ/mol的能量。ATP 是細(xì)胞內(nèi)特殊的自由能載體，廣泛地存在于細(xì)胞內(nèi)，如細(xì)胞核、細(xì)胞溶膠、線粒體等。易水解，且水解時(shí)可釋放出大量的能量，但水解易受細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的pH 、Mg 2+濃度等的影響。在活的生物體中，ATP 被用于貯存和傳遞化學(xué)能，當(dāng)生物體死亡后，在胞內(nèi)酶的作用下，ATP 很快被分解掉。因此，測(cè)定樣品中的ATP 濃度，即可推算出活菌數(shù)[1]。每個(gè)細(xì)胞的ATP 含量大致是一定的，如大腸桿菌是1.4×10-18 mol/細(xì)胞，乳酸菌是1.9×10-18 mol/細(xì)胞，則由此可以推算出細(xì)菌數(shù)量。但由于實(shí)際檢測(cè)中除含有細(xì)菌外，還含有酵母等其他微生物，而酵母菌中ATP 的含量通常是細(xì)菌中ATP 含量的100倍左右[2]。因此，若同時(shí)又全部換算成酵母菌的活菌數(shù)量，則樣品中活菌數(shù)應(yīng)介于二者之間。 1.2 ATP生物發(fā)光法檢測(cè)步驟

ATP 生物發(fā)光法的檢測(cè)步驟大體包括[3]：取樣、樣品ATP 的萃取、添加熒光素- 熒光素酶、測(cè)定生物發(fā)光量、求出ATP 濃度和活菌數(shù)。通常，樣品未經(jīng)處理是不能測(cè)定ATP 的。測(cè)定時(shí)需先將樣品與ATP 提取劑混合，使細(xì)胞膜和細(xì)胞壁溶解，釋放出ATP 。ATP 提取劑是以表面活性劑為基質(zhì)的專用試劑。然后，提取出的

2 免疫磁性分離技術(shù)在微生物檢測(cè)中的應(yīng)用

免疫磁性分離(Immuno-magnetic capture)技術(shù)是依賴于免疫磁性微球的一種分離技術(shù)，已應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)以及環(huán)境和食品衛(wèi)生檢測(cè)等方面。由于食品檢樣常為固液多相混合體，采用常規(guī)方法難以將少量的致病微生物分離出來。借助免疫磁性分離技術(shù)，可以達(dá)到快速分離的目的。免疫磁性分離技術(shù)與常規(guī)檢驗(yàn)方法相比具有顯著的優(yōu)點(diǎn)，可以很快地在含有大量雜菌的懸液有選擇性地分離出目的微生物，并節(jié)省時(shí)間。 2.1 免疫磁性分離技術(shù)原理

免疫磁珠法分離技術(shù)基于細(xì)胞表面抗原能與連接在磁珠上的特異性單抗相結(jié)合，在外磁場(chǎng)中，通過抗體與磁珠相連的細(xì)胞被吸附而滯留在磁場(chǎng)中，無該種表面抗原的細(xì)胞由于不能與相連著磁珠的特異性單抗結(jié)合而沒有磁性，不在磁場(chǎng)中停留，從而使細(xì)

[收稿日期] 2012-12-06

[作者簡(jiǎn)介] 劉翔軍(1984-)，男，福建人，本科，主要研究方向?yàn)槭称肺⑸餀z驗(yàn)。