生物培養診斷法？實驗室診斷 １．２．１ 普通營養瓊脂平板，３７℃培養１８～２４ｈ，而后進行純化培養。挑取分離培養的單菌落，進行革蘭氏染色、鏡檢。用滅菌接種環勾取少許純培養物接種于各種生化培養基中，３７℃培養１８～２４ｈ后觀察結果。那么，生物培養診斷法？一起來了解一下吧。
診斷微生物學檢查（1）病料采集：取病畜禽的組織，肝，肺，脾等體液、分泌物及局部病灶的滲出液。（2）鏡檢：對原始病料涂片進行革蘭氏染色，鏡檢，應為革蘭氏陰性。用印度墨汁等染料染色，可見清晰的莢膜。（3）培養：同時接種鮮血瓊脂和麥康凱瓊脂培養基，37℃培養24h，觀察細菌的生長情況，菌落特征、溶血性，并染色鏡檢。（4）生化試驗：多殺性巴氏桿菌在48h內可分解葡萄糖、果糖、單奶糖、蔗糖和甘露糖，產酸不產氣。一般不發酵乳糖、山虧扮鼠李糖、菊糖、水楊苷和肌醇。可產生硫化氫，能形成靛基質，MR和V-P試驗均為陰性。接觸酶和氧化酶試驗均為陽性。溶血性巴氏桿菌不產生靛基質，能發酵乳糖產酸。能發酵葡空磨萄糖、糖元、肌醇、麥芽糖、淀粉；不發酵側金盞花醇、菊糖和赤蘚醇。動物試驗常用的試驗動物有小鼠和家兔。實驗動物死亡后立即剖檢，并取心血和實質臟器分離和涂片染色鏡檢，見大量兩極濃逗灶染的細菌即可確診。血清型或生物型鑒定可用被動血凝試驗、凝集試驗鑒定多殺性巴氏桿菌莢膜血清群和血清型。用間接血凝試驗測溶血性巴氏桿菌的血清型，根據生化反應鑒定該菌的生物型。（以上內容是我查到的資料，希望對你有所幫助！）
臨床上疑似白喉的病人不必等待檢驗結果，應立即給予抗毒素和抗生素治療。但對于白喉流行期的首例病人應做微生物學檢驗予以證實。
直接染色鏡檢
用棉拭采取假膜邊緣部滲出物，涂片，用奈瑟氏染色或美蘭染色，鏡檢有無含異染顆粒的棒狀桿菌。結合臨床癥狀，可作出初步診斷。確診必須通過細菌培養并進行毒力試驗旅搏。
凝固血清棉拭培養法
將沾有馬或牛血清的棉拭子放在無菌試管內，經8～10磅蒸氣滅菌20～30分鐘，并使血清凝固，且此凝固血清棉拭采取病人咽部標本，置37℃培養8～10小時后，直接涂片鏡檢。此法可作為大量檢查時快速培養診斷之用。
培養檢查
將棉試檢材接種于雞蛋斜面或Loeffer''''s血清凝固斜面培養基及亞碲酸鉀平板培養基上，置37℃培養，拆哪祥待斜面或平板上長出典型的灰色疑菌落，挑取轉種到雞蛋呀或血清斜面進行分離培養，以供進一步形態染色或毒力試驗鑒定。
毒力試驗
1．豚鼠試緩空驗 取體重250g 豚鼠2只，其中一只試驗前12小時，由腹腔注射白喉抗毒素250～500單位，供做對照。然后對照。然后各于皮下注射48小時的培養液2ml，若于2～4天注射抗毒素的豚鼠死亡，而對照豚鼠存活，便證明所試驗菌株為有毒白喉桿菌。
疑似炭疽死亡動伍虧物的尸體，應盡快自末梢血管（耳尖、腔兆神尾尖等）采血，涂片染色鏡檢，取血后應立即用烙鐵將創口烙焦，以止血封口。由于病尸體內的炭疽桿菌暴露于空氣中，接觸了氧，氣溫又不適宜其生長時，就會形成芽孢，所以尸體嚴禁剖檢。
（1）涂片鏡檢取標本涂片進行革蘭氏染色，發現有莢膜的呈竹節狀排列的革蘭氏陽性大桿菌，結合臨床癥狀可作出初步診斷。陳舊病料可以看到“菌影”，確診須做分離培養和動物接種。
（2）分離培猜坦養取病料接種普通瓊脂或血液瓊脂，37℃培養18-24h，觀察有無典型的炭疽桿菌菌落，同時革蘭氏染色鏡檢。
（3）動物試驗將待檢材料或培養物用生理鹽水做適當稀釋和磨勻后，皮下注射小鼠0、1-0、2ml,如為炭疽，多在18-24h因敗血病死亡。剖檢可見注射部位皮下膠樣水腫，脾臟腫大。取臟器涂片鏡檢，如發現有莢膜竹節狀大桿菌，可確診。
（4）血清學試驗常用炭疽環狀沉淀試驗（Ascoli氏反應）。方法是：在一支小玻璃管內把疑為炭疽病死亡動物尸體組織的浸出液與特異性炭疽沉淀素血清重疊，若二液接觸面產生灰白色沉淀環，即可診斷。
實驗室診斷
１．２．１
普通營養瓊脂平板，３７℃培養１８～２４ｈ，而后進行純化培養。挑取分離培養的單菌落，進行革蘭氏染色、鏡檢。用滅菌接種環勾取少許純培養物接種于各種生化培養基中，３７℃培養１８～２４ｈ后觀察結果。將細菌純培養物用無菌生理鹽水洗下，稀釋成３×１０１１個／ｍｌ的菌懸液，用無菌棉拭子蘸取稀釋液均勻涂布于普通平板，經室溫干燥３～５ｍ乎坦ｉｎ后，每塊平板貼藥敏紙片３片，３７℃培養１８～２４
２２．１坦頃爛
ｈ。
結果
剖檢病變
剖檢可見病雞胸腔、腹腔內有大量
黃色干酪樣滲出物；心包積液，心臟有纖維素性滲出物；肝臟腫大，表面瘀血，有纖維素性滲出物；肺臟瘀血，表面的纖維素性滲出物明顯；氣囊混濁、變厚；腎瘀血、質脆，一觸即爛；脾臟瘀血。
２．２病理組織學變化鏡下觀察，可見肝臟有蛋白質纖維膜，肝細胞變性，竇狀隙內紅細胞增多，肝臟瘀血（圖１）；腎臟病變比較嚴重，腎小管上皮細胞壞死，脫離基底膜，腎小管管腔內混有脫落的上皮細胞和滲出物（圖２）；肺表面肺泡細胞塌陷，外有蛋白質纖維膜，肺血管內有大量紅細胞聚集，肺瘀血
（圖３）。
病理剖檢對送檢的２５只病死雞進行了病
取病死雞心、肝、脾、肺、
理剖檢及大體病變的觀察。１讓漏．２．２組織病理學檢查
腎等器官病健交界處部分組織塊，置于１０％福爾馬林中固定，經乙醇脫水后，二甲苯透明、浸蠟，將組織在ＢＭＪ一１生物組織包埋機下包埋成石蠟塊，用ＡＯ一８２５０型組織切片機切片，厚度為５肛ｍ，ＨＥ染色，顯微鏡觀察并照相。
病原微生物種類繁多，變異迅速，快速鑒定病原微生物的檢驗技術也在不斷發展前進著。目前，應用比較廣泛的病原微生物檢測方法主要有直接涂片鏡檢、分離培養、生化反應、血清學反應、核酸分子雜交、基因芯片、多聚酶鏈反應等，該文對這些檢測技術進展做一綜述。 對人和動物具有致病性的微生物稱為病原微生物，又稱病原體，有病毒、細菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體、真菌、放線菌、朊粒等。這些病原微生物可引起感染、過敏、腫瘤、癡呆等疾病，也是危害食品安全的主要因素之一。近年來出現的SARS、高致病性禽流感、西尼羅病毒感染等疾病的傳染性極強，往往造成世界性大流行，因此對病原體的檢測必須做到快速、準確。常規病原學檢測方法操作繁瑣，檢測周期長，而且對操作人員技術水平要求比較高。隨著醫學微生物學研究技術的不斷發展，病原學診斷已不再局限于病原體水平，深入到分子水平、基因水平的檢測手段不斷出現并被應用于臨床和實驗室 J。核酸分子雜交毀握技術、PCR技術、基因芯片技術等檢測方法，自動化程度高，快速省時、無污染、結果精確，可以準確靈敏地鑒定病原微生物。1 傳統的病原微生物的檢測方法傳統的病原微生物學實驗室檢查以染色、培養、生化鑒定等為主，將標本直接涂片染色鏡檢和接種在培養基上進行分離培養是對細菌或真菌感染性疾病進行病原學診斷的常用方法。
以上就是生物培養診斷法的全部內容，選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特征進行間接判斷，得到的微生物往往并不只有一種，但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特征從而對其分類。使用鑒別培養基。即根據微生物的代謝特點。
