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腸道微生物檢測,腸道菌群基因檢測

  • 生物
  • 2024-07-24

腸道微生物檢測?腸道菌群,人體腸道的正常微生物,如雙歧桿菌,乳酸桿菌等能合成多種人體生長發育必須的維生素,如B族維生素(維生素B1、B2、B6、B12),維生素K,煙酸、泛酸等,還能利用蛋白質殘渣合成必需氨基酸,如天冬門氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸和蘇氨酸等,并參與糖類和蛋白質的代謝,同時還能促進鐵、鎂、那么,腸道微生物檢測?一起來了解一下吧。

腸道微生物檢測有啥意義

大腸埃希氏菌(Escherichia coli)通常被稱為大腸桿菌,是Escherich在1885年發現的,在相當長的一段時間內,一直被當作正常腸道菌群的組成部分,認為是非致病菌。直到20世紀中葉,才認識到一些特殊血清型的大腸桿菌對人和動物有病原性,尤其對嬰兒和幼畜(禽),常引起嚴重腹瀉和敗血癥,它是一種普通的原核生物,根據不同的生物學特性將致病性大腸桿菌分為6類:腸致病性大腸桿菌(EPEC)、腸產毒性大腸桿菌(ETEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)和彌散粘附性大腸桿菌(DAEC).。大腸桿菌屬于革蘭氏陰性細菌(G-)。

細菌的分離鑒定

1、標本:腸道外感染取中段尿、血液、膿液、腦脊液等,腹瀉者取糞便。

2、分離培養與鑒定:糞便標本直接接種腸道桿菌選擇性培養基。血液需先經肉湯增菌,再轉種血瓊脂平板。其他標本可同時接種血瓊脂平板和腸道桿菌選擇性培養基。37℃孵育18~24小時后,觀察菌落并涂片染色鏡檢。采用一系列生化反應進行鑒定。腸致病性大腸桿菌須先作血清學定型試驗。必要時檢定腸霉毒素。

泌尿系統除確定大腸桿菌外,還應計數,每毫升尿含菌量≥100,000時,才有診斷價值。

腸道菌群研究方法

1、血液標本,在病程的1-2周采集,但只要發熱持續,兩周后依然可以采血檢測。

2、糞便標本,在病程的3-4周采集,取3g新鮮糞便或肛拭進行微生物檢測。

3、骨髓標本,全病程均可采集。

腸道微生物如何驗證

腸道菌群,也稱為腸道微生物群,是指生活在人體腸道中的大量細菌構成的集體 。它們并不是與生俱來的,而是從出生后開始逐漸在腸道中定植并形成穩定的菌群構成。腸道菌群的構成復雜,細菌種類繁多,可以大致分為三種類型:共生菌群、條件致病菌群和致病菌群 。共生菌群主要包括擬桿菌、梭菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌等,它們與人體形成良好的合作關系,輔助消化多種食物,并保護我們的腸道 。

腸道菌群與人體健康息息相關,它們不僅幫助我們消化食物,還參與合成維生素、調節免疫系統、影響神經內分泌等多種生理活動 。近年來,隨著研究的深入,人們發現腸道菌群與營養不良、肥胖癥、糖尿病等疾病也存在關聯 。此外,腸道菌群還與自閉癥、心血管疾病、肝病等有著潛在的聯系。

現在,人們越來越重視腸道菌群檢測,這是因為腸道菌群的平衡對于維持宿主的代謝健康至關重要。紊亂的腸道菌群可能會導致多種常見代謝病的發生,包括肥胖、2型糖尿病、非酒精性肝病等 。通過檢測腸道菌群,可以幫助了解個體的腸道健康狀況,評估疾病風險及亞健康狀況,為個性化的飲食和生活方式調整提供依據 。

希胞生物的腸道菌群檢測方法包括但不限于16S rRNA基因測序、宏基因組測序等,這些技術能夠幫助識別和定量腸道中的不同微生物種類 。

菌落總數測定方法

一、細菌的分離鑒定

1、標本:腸道外感染取中段尿、血液、膿液、腦脊液等,腹瀉者取糞便。

2、分離培養與鑒定:糞便標本直接接種腸道桿菌選擇性培養基。血液需先經肉湯增菌,再轉種血瓊脂平板。其他標本可同時接種血瓊脂平板和腸道桿菌選擇性培養基。

37℃孵育18~24小時后,觀察菌落并涂片染色鏡檢。采用一系列生化反應進行鑒定。腸致病性大腸桿菌須先作血清學定型試驗。必要時檢定腸霉毒素。

泌尿系統除確定大腸桿菌外,還應計數,每毫升尿含菌量≥100,000時,才有診斷價值。

二、衛生細菌學檢查

大腸桿菌不斷隨糞便排出體外,污染周圍環境和水源、食品等。取樣檢查時,樣品中大腸桿菌越多,表示樣品被糞便污染越嚴重,也表明樣品中存在腸道致病菌的可能性越大。故應對飲水、食品、飲料進行衛生細菌學檢查。

1、細菌總數:檢測每毫升或每克樣品中所含細菌數,采用傾注培養計算。中國規定的衛生標準是每毫升飲水中細菌總數不得超過100個。

2、大腸菌數指數:指每立升中大腸菌群數,采用乳糖發酵法檢測。中國的衛生標準是每1000ml飲水中不得超過3個大腸菌群;瓶裝汽水、果汁等每100ml大腸菌群不得超過5個。

三、全自動微生物定量分析儀(TEMPO)檢測

全自動微生物定量分析(TEMPO)儀的大腸桿菌群計數檢測有TC和CC兩種方法。

大便菌群分析

腸熱癥(傷寒病癥)是傷寒病和副傷寒病的總稱,主要由傷寒桿菌和甲、乙、丙型副傷寒桿菌引起,也有侵襲性非傷寒沙門菌(iNTS)可致傷寒。

該類菌種主要從臨床分離,食品、環境、非哺乳類動物等較少能分離獲得。食品養殖動物(如禽畜類)也會有傷寒(如雞傷寒雞白痢等)病癥,但宿主僅限于動物。

該類菌種鑒定是在有臨床病癥的病人樣品中分離到菌株,種屬確認至沙門氏菌屬后,進行血清學分型,如果是傷寒、甲乙丙副傷寒這四類可直接確認,如果是非傷寒沙門菌,一定要結合樣品來源確認,一般iNTS的判定標準和病人樣品來源直接相關,本應無菌的非腸道來源組織或器官,多為血液、骨關節、腦脊液等。

以上就是腸道微生物檢測的全部內容,大腸菌群系指一群能發酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。該菌主要來于人畜糞便,故以此作為糞便污染指標來評價食品的衛生質量,推斷食品中有否污染腸道致病菌的可能。食品中大腸菌群數系以100mL(g)檢樣內大腸菌群最可能數(MPN)表示。1 設備和材料 1.1 溫箱:36±1℃。

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