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腸道微生物檢測(cè),腸道菌群基因檢測(cè)

  • 生物
  • 2024-07-24

腸道微生物檢測(cè)?腸道菌群,人體腸道的正常微生物,如雙歧桿菌,乳酸桿菌等能合成多種人體生長(zhǎng)發(fā)育必須的維生素,如B族維生素(維生素B1、B2、B6、B12),維生素K,煙酸、泛酸等,還能利用蛋白質(zhì)殘?jiān)铣杀匦璋被幔缣於T氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸和蘇氨酸等,并參與糖類和蛋白質(zhì)的代謝,同時(shí)還能促進(jìn)鐵、鎂、那么,腸道微生物檢測(cè)?一起來(lái)了解一下吧。

腸道微生物檢測(cè)有啥意義

大腸埃希氏菌(Escherichia coli)通常被稱為大腸桿菌,是Escherich在1885年發(fā)現(xiàn)的,在相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi),一直被當(dāng)作正常腸道菌群的組成部分,認(rèn)為是非致病菌。直到20世紀(jì)中葉,才認(rèn)識(shí)到一些特殊血清型的大腸桿菌對(duì)人和動(dòng)物有病原性,尤其對(duì)嬰兒和幼畜(禽),常引起嚴(yán)重腹瀉和敗血癥,它是一種普通的原核生物,根據(jù)不同的生物學(xué)特性將致病性大腸桿菌分為6類:腸致病性大腸桿菌(EPEC)、腸產(chǎn)毒性大腸桿菌(ETEC)、腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、腸出血性大腸桿菌(EHEC)、腸黏附性大腸桿菌(EAEC)和彌散粘附性大腸桿菌(DAEC).。大腸桿菌屬于革蘭氏陰性細(xì)菌(G-)。

細(xì)菌的分離鑒定

1、標(biāo)本:腸道外感染取中段尿、血液、膿液、腦脊液等,腹瀉者取糞便。

2、分離培養(yǎng)與鑒定:糞便標(biāo)本直接接種腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基。血液需先經(jīng)肉湯增菌,再轉(zhuǎn)種血瓊脂平板。其他標(biāo)本可同時(shí)接種血瓊脂平板和腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基。37℃孵育18~24小時(shí)后,觀察菌落并涂片染色鏡檢。采用一系列生化反應(yīng)進(jìn)行鑒定。腸致病性大腸桿菌須先作血清學(xué)定型試驗(yàn)。必要時(shí)檢定腸霉毒素。

泌尿系統(tǒng)除確定大腸桿菌外,還應(yīng)計(jì)數(shù),每毫升尿含菌量≥100,000時(shí),才有診斷價(jià)值。

腸道菌群研究方法

1、血液標(biāo)本,在病程的1-2周采集,但只要發(fā)熱持續(xù),兩周后依然可以采血檢測(cè)。

2、糞便標(biāo)本,在病程的3-4周采集,取3g新鮮糞便或肛拭進(jìn)行微生物檢測(cè)。

3、骨髓標(biāo)本,全病程均可采集。

腸道微生物如何驗(yàn)證

腸道菌群,也稱為腸道微生物群,是指生活在人體腸道中的大量細(xì)菌構(gòu)成的集體 。它們并不是與生俱來(lái)的,而是從出生后開始逐漸在腸道中定植并形成穩(wěn)定的菌群構(gòu)成。腸道菌群的構(gòu)成復(fù)雜,細(xì)菌種類繁多,可以大致分為三種類型:共生菌群、條件致病菌群和致病菌群 。共生菌群主要包括擬桿菌、梭菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌等,它們與人體形成良好的合作關(guān)系,輔助消化多種食物,并保護(hù)我們的腸道 。

腸道菌群與人體健康息息相關(guān),它們不僅幫助我們消化食物,還參與合成維生素、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)、影響神經(jīng)內(nèi)分泌等多種生理活動(dòng) 。近年來(lái),隨著研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)腸道菌群與營(yíng)養(yǎng)不良、肥胖癥、糖尿病等疾病也存在關(guān)聯(lián) 。此外,腸道菌群還與自閉癥、心血管疾病、肝病等有著潛在的聯(lián)系。

現(xiàn)在,人們?cè)絹?lái)越重視腸道菌群檢測(cè),這是因?yàn)槟c道菌群的平衡對(duì)于維持宿主的代謝健康至關(guān)重要。紊亂的腸道菌群可能會(huì)導(dǎo)致多種常見(jiàn)代謝病的發(fā)生,包括肥胖、2型糖尿病、非酒精性肝病等 。通過(guò)檢測(cè)腸道菌群,可以幫助了解個(gè)體的腸道健康狀況,評(píng)估疾病風(fēng)險(xiǎn)及亞健康狀況,為個(gè)性化的飲食和生活方式調(diào)整提供依據(jù) 。

希胞生物的腸道菌群檢測(cè)方法包括但不限于16S rRNA基因測(cè)序、宏基因組測(cè)序等,這些技術(shù)能夠幫助識(shí)別和定量腸道中的不同微生物種類 。

菌落總數(shù)測(cè)定方法

一、細(xì)菌的分離鑒定

1、標(biāo)本:腸道外感染取中段尿、血液、膿液、腦脊液等,腹瀉者取糞便。

2、分離培養(yǎng)與鑒定:糞便標(biāo)本直接接種腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基。血液需先經(jīng)肉湯增菌,再轉(zhuǎn)種血瓊脂平板。其他標(biāo)本可同時(shí)接種血瓊脂平板和腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基。

37℃孵育18~24小時(shí)后,觀察菌落并涂片染色鏡檢。采用一系列生化反應(yīng)進(jìn)行鑒定。腸致病性大腸桿菌須先作血清學(xué)定型試驗(yàn)。必要時(shí)檢定腸霉毒素。

泌尿系統(tǒng)除確定大腸桿菌外,還應(yīng)計(jì)數(shù),每毫升尿含菌量≥100,000時(shí),才有診斷價(jià)值。

二、衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查

大腸桿菌不斷隨糞便排出體外,污染周圍環(huán)境和水源、食品等。取樣檢查時(shí),樣品中大腸桿菌越多,表示樣品被糞便污染越嚴(yán)重,也表明樣品中存在腸道致病菌的可能性越大。故應(yīng)對(duì)飲水、食品、飲料進(jìn)行衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查。

1、細(xì)菌總數(shù):檢測(cè)每毫升或每克樣品中所含細(xì)菌數(shù),采用傾注培養(yǎng)計(jì)算。中國(guó)規(guī)定的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是每毫升飲水中細(xì)菌總數(shù)不得超過(guò)100個(gè)。

2、大腸菌數(shù)指數(shù):指每立升中大腸菌群數(shù),采用乳糖發(fā)酵法檢測(cè)。中國(guó)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是每1000ml飲水中不得超過(guò)3個(gè)大腸菌群;瓶裝汽水、果汁等每100ml大腸菌群不得超過(guò)5個(gè)。

三、全自動(dòng)微生物定量分析儀(TEMPO)檢測(cè)

全自動(dòng)微生物定量分析(TEMPO)儀的大腸桿菌群計(jì)數(shù)檢測(cè)有TC和CC兩種方法。

大便菌群分析

腸熱癥(傷寒病癥)是傷寒病和副傷寒病的總稱,主要由傷寒桿菌和甲、乙、丙型副傷寒桿菌引起,也有侵襲性非傷寒沙門菌(iNTS)可致傷寒。

該類菌種主要從臨床分離,食品、環(huán)境、非哺乳類動(dòng)物等較少能分離獲得。食品養(yǎng)殖動(dòng)物(如禽畜類)也會(huì)有傷寒(如雞傷寒雞白痢等)病癥,但宿主僅限于動(dòng)物。

該類菌種鑒定是在有臨床病癥的病人樣品中分離到菌株,種屬確認(rèn)至沙門氏菌屬后,進(jìn)行血清學(xué)分型,如果是傷寒、甲乙丙副傷寒這四類可直接確認(rèn),如果是非傷寒沙門菌,一定要結(jié)合樣品來(lái)源確認(rèn),一般iNTS的判定標(biāo)準(zhǔn)和病人樣品來(lái)源直接相關(guān),本應(yīng)無(wú)菌的非腸道來(lái)源組織或器官,多為血液、骨關(guān)節(jié)、腦脊液等。

以上就是腸道微生物檢測(cè)的全部?jī)?nèi)容,大腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌。該菌主要來(lái)于人畜糞便,故以此作為糞便污染指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)食品的衛(wèi)生質(zhì)量,推斷食品中有否污染腸道致病菌的可能。食品中大腸菌群數(shù)系以100mL(g)檢樣內(nèi)大腸菌群最可能數(shù)(MPN)表示。1 設(shè)備和材料 1.1 溫箱:36±1℃。

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