免疫組織化學(xué)技術(shù)?免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry,IHC)是一種結(jié)合了免疫反應(yīng)的特異性與組織化學(xué)的可見(jiàn)性,通過(guò)在組織細(xì)胞原位進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)呈色反應(yīng),對(duì)特定抗原進(jìn)行定性、定位和定量測(cè)定的先進(jìn)技術(shù)。IHC技術(shù)將免疫反應(yīng)的特異性與組織化學(xué)的可見(jiàn)性巧妙結(jié)合,借助顯微鏡(包括熒光顯微鏡、那么,免疫組織化學(xué)技術(shù)?一起來(lái)了解一下吧。
IHC的意思是免疫組織化學(xué)。
免疫組織化學(xué)是一種結(jié)合組織化學(xué)和免疫學(xué)原理的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法。它在醫(yī)學(xué)診斷和生物學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下面將詳細(xì)介紹IHC的相關(guān)內(nèi)容。
IHC結(jié)合了抗體的特異性和組織化學(xué)的直觀性,用于檢測(cè)細(xì)胞或組織中的特定抗原。這種方法的基本原理是利用特異性抗體與抗原之間的結(jié)合反應(yīng),通過(guò)標(biāo)記抗體來(lái)檢測(cè)并定位組織樣本中的特定分子。這種技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于其高度的特異性和敏感性,使得醫(yī)生能夠更準(zhǔn)確地診斷疾病和評(píng)估病情。
在醫(yī)學(xué)診斷領(lǐng)域,IHC常用于病理檢測(cè),特別是在腫瘤診斷中。通過(guò)對(duì)腫瘤組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,醫(yī)生可以了解腫瘤細(xì)胞的特征,確定腫瘤的類型和分化程度,從而制定出更合適的治療方案。此外,IHC還用于檢測(cè)病原體感染、評(píng)估藥物療效以及預(yù)測(cè)疾病復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)等方面。
除了醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,IHC也在生物學(xué)研究中有廣泛的應(yīng)用。生物學(xué)家可以利用IHC技術(shù)來(lái)研究蛋白質(zhì)的表達(dá)模式、細(xì)胞間的相互作用以及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等生物學(xué)過(guò)程。通過(guò)檢測(cè)特定蛋白的定位和功能,研究人員可以更深入地了解生物體系的復(fù)雜性和調(diào)控機(jī)制。
總而言之,免疫組織化學(xué)是一種重要的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法,結(jié)合了組織化學(xué)和免疫學(xué)的原理,廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)診斷和生物學(xué)研究。
免疫組織化學(xué)技術(shù)是一種檢測(cè)組織內(nèi)特定抗原性物質(zhì)的現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)手段。該技術(shù)主要應(yīng)用于檢測(cè)肽類、激素、神經(jīng)遞質(zhì)、細(xì)胞因子、受體、表面抗原等分子在組織內(nèi)的原位表達(dá)情況。以下將詳細(xì)闡述免疫組化染色實(shí)驗(yàn)的具體步驟,包括組織和細(xì)胞標(biāo)本的準(zhǔn)備、石蠟切片和冰凍切片的免疫組化染色過(guò)程。
(一) 組織和細(xì)胞標(biāo)本的準(zhǔn)備
在準(zhǔn)備組織標(biāo)本時(shí),應(yīng)確保其新鮮、固定及時(shí)、形態(tài)完好。細(xì)胞標(biāo)本的準(zhǔn)備方式則需根據(jù)其來(lái)源和類型有所不同。活體細(xì)胞標(biāo)本可通過(guò)印片法、穿刺吸取法或沉淀法獲取,而培養(yǎng)細(xì)胞標(biāo)本則可選擇細(xì)胞涂片法或細(xì)胞爬片法,其中細(xì)胞涂片法要求將細(xì)胞懸液涂在載玻片上,晾干后固定處理;細(xì)胞爬片法則是將細(xì)胞直接培養(yǎng)在蓋玻片或培養(yǎng)板上。不論是哪種方法,標(biāo)本均需進(jìn)行固定處理。固定作用旨在保持組織形態(tài),保存抗原,硬化組織,以及便于后續(xù)的觀察。
在固定過(guò)程中需注意防止脫片,確保組織新鮮、避免干燥,并控制組織塊大小不超過(guò)一定范圍。固定劑的量通常需超過(guò)組織體積的20倍,且需充分水洗,去除固定劑,以減少人為的假像。
(二) 石蠟切片免疫組化染色實(shí)驗(yàn)步驟
石蠟切片前,需先將組織進(jìn)行脫蠟處理。
IHC在醫(yī)學(xué)上指的是免疫組織化學(xué)。
解釋:
一、IHC的基本定義
免疫組織化學(xué)是一種將免疫學(xué)方法與組織化學(xué)技術(shù)相結(jié)合的方法。它利用抗原與抗體的特異性結(jié)合來(lái)定位、定性以及半定量檢測(cè)細(xì)胞或組織中的特定抗原。這種方法廣泛應(yīng)用于病理學(xué)研究中,特別是在病理學(xué)診斷和疾病預(yù)后評(píng)估方面具有重要意義。
二、IHC在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,IHC常被用于研究疾病發(fā)生、發(fā)展的機(jī)制,特別是在腫瘤診斷方面。通過(guò)對(duì)腫瘤組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,可以觀察到腫瘤細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn),同時(shí)確定某些腫瘤相關(guān)抗原的表達(dá)情況,從而輔助病理醫(yī)生做出更準(zhǔn)確的診斷。此外,IHC還可用于檢測(cè)細(xì)胞凋亡、新生血管形成等生物學(xué)過(guò)程,為藥物研發(fā)和療效評(píng)估提供依據(jù)。
三、IHC的技術(shù)流程
IHC的技術(shù)流程主要包括組織切片制備、抗原修復(fù)、抗體孵育、顯色反應(yīng)等步驟。通過(guò)對(duì)切片進(jìn)行特殊處理,使抗原抗體結(jié)合位點(diǎn)暴露,然后加入特異性抗體進(jìn)行孵育,再通過(guò)顯色劑顯示抗原表達(dá)部位。這樣,研究者就可以通過(guò)觀察切片上的顏色變化來(lái)了解特定抗原的分布和表達(dá)情況。
醫(yī)學(xué)上ihc就是免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry,IHC)
免疫組織化學(xué)是指帶顯色劑標(biāo)記的特異性抗體在組織細(xì)胞原位通過(guò)抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng),對(duì)相應(yīng)抗原進(jìn)行定性、定位、定量測(cè)定的一項(xiàng)新技術(shù)。免疫組織化學(xué)是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對(duì)其進(jìn)行定位、定性及定量的研究。
擴(kuò)展資料:
免疫組織化學(xué)染色在生物醫(yī)學(xué)研究中具有十分廣泛的作用。并且涉及許多研究領(lǐng)域。但是,免疫組織化學(xué)技術(shù)也有其局限性,例如,組織細(xì)胞內(nèi)的待測(cè)物質(zhì)要有抗原性,而且需要有一定濃度方可檢出;檢出的免疫反應(yīng)陽(yáng)性蛋白不能被確定是細(xì)胞新合成的蛋白還是通過(guò)細(xì)胞間運(yùn)輸而來(lái)的蛋白,因此,在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中應(yīng)充分考慮這些特點(diǎn)。如果實(shí)驗(yàn)需要證明已知蛋白為何種細(xì)胞合成,需采用分子原位雜交技術(shù)解決。
參考資料來(lái)源:
免疫組織化學(xué)染色法是一種利用熒光抗體或熒光抗原來(lái)檢測(cè)特定抗原或抗體的方法。它包括直接法、間接法和補(bǔ)體法等不同技術(shù)。
直接法分為檢查抗原和抗體兩種。檢查抗原直接使用已知特異性熒光抗體,簡(jiǎn)便快速,但針對(duì)單一抗原,敏感性不高。檢查抗體則是標(biāo)記熒光抗原與細(xì)胞或組織中的抗體反應(yīng),顯示出抗體的存在。
間接法則是通過(guò)“夾心”或“間接”方式檢測(cè)。夾心法是先讓抗體與抗原反應(yīng),再用熒光抗體與之結(jié)合,形成抗原-抗體-熒光抗體復(fù)合物。間接法還用于血清抗體檢測(cè),如自身抗體和病原體抗體的篩查。
補(bǔ)體法有直接和間接兩種。直接檢查免疫復(fù)合物通過(guò)熒光抗體與補(bǔ)體反應(yīng),間接法則利用新鮮補(bǔ)體與抗體復(fù)合后,再與熒光抗體結(jié)合。這種技術(shù)能增強(qiáng)檢測(cè)的靈敏度,且適應(yīng)多種抗體標(biāo)記。
當(dāng)需要在同一組織標(biāo)本上同時(shí)檢測(cè)兩種抗原時(shí),雙重免疫熒光染色采用直接法,混合兩種熒光抗體,一種標(biāo)記黃綠色,另一種標(biāo)記紅色,以清晰顯示兩種抗原的位置。
擴(kuò)展資料
孫云云,山東萊西人。畢業(yè)于青島大學(xué)。現(xiàn)任青島基爾祿工藝禮品有限公司助理工藝師,兼任設(shè)計(jì)師。
以上就是免疫組織化學(xué)技術(shù)的全部?jī)?nèi)容,通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對(duì)其進(jìn)行定位、定性及相對(duì)定量的研究。抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái),以此作為抗原或半抗原。