微生物染色染料分為?染料分為天然染料和人工染料兩種。天然染料有胭脂蟲紅、地衣素、石蕊和蘇木素等,它們多從植物體中提取得到,其成分復(fù)雜,有些至今還未搞清楚。目前主要采用人工染料,也稱煤焦油染料,多從煤焦油中提取獲得,是苯的衍生物。多數(shù)染料為帶色的有機(jī)酸或堿類,難溶于水,而易溶于有機(jī)溶劑中。那么,微生物染色染料分為?一起來了解一下吧。
微生物學(xué)中,主要采用兩種染色方法來觀察和區(qū)分不同的微生物。
首先是簡單染色,這種方法利用單一染料對(duì)微生物進(jìn)行染色,主要步驟包括:將微生物涂片、干燥、固定、染色、水洗后進(jìn)行鏡檢。常用的微生物細(xì)胞染料包括多種鹽類,其中堿性染料有美蘭、甲基紫、結(jié)晶紫、堿性復(fù)紅、中性紅、孔雀綠和蕃紅等;而酸性染料則包括伊紅、剛果紅、藻紅、苦味酸和酸性復(fù)紅等。
另一種方法是革蘭氏染色法,主要用于區(qū)分革蘭氏陰性菌(G-)和革蘭氏陽性菌(G+)。其原理是基于革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的差異。革蘭氏染色法的主要步驟包括制片、初染、媒染、脫色和復(fù)染。最終,被染成藍(lán)紫色的菌體為革蘭氏陽性菌(G+),被染成紅色的菌體則是革蘭氏陰性菌(G-)。
簡單染色法適用于快速識(shí)別和初步分類微生物,而革蘭氏染色法則能更準(zhǔn)確地辨別細(xì)菌的種類,對(duì)于微生物學(xué)研究具有重要意義。
在實(shí)驗(yàn)室中,這兩種方法常被結(jié)合使用,以確保對(duì)微生物的準(zhǔn)確識(shí)別和分類。簡單染色可以快速篩查,而革蘭氏染色法則提供更深入的分類信息。
通過這兩種染色方法,微生物學(xué)家能夠更準(zhǔn)確地了解微生物的種類、特性及相互關(guān)系,這對(duì)于疾病的診斷、治療以及生物技術(shù)的發(fā)展具有重要作用。
微生物染色過程中的染料種類和選擇是至關(guān)重要的。染料主要分為兩大類:天然染料和人工染料。天然染料,如胭脂蟲紅、地衣素、石蕊和蘇木素,源自植物,其化學(xué)結(jié)構(gòu)復(fù)雜,一些成分尚未完全解析。而人工染料,通常稱為煤焦油染料,主要來自煤焦油,是苯的衍生物,如苯胺黑和酸性復(fù)紅等。
根據(jù)染料電離后離子的性質(zhì),染料可分為四類:酸性染料,如伊紅和剛果紅,它們的染料離子帶負(fù)電,適合在細(xì)菌pH值下降時(shí),如糖類分解產(chǎn)生酸的情況下,使微生物著色。堿性染料如美蘭和甲基紫,帶正電離子,一般情況下細(xì)菌容易被這類染料染色,如常用的結(jié)晶紫和堿性復(fù)紅。
中性(復(fù)合)染料是酸性和堿性染料的結(jié)合體,如瑞脫氏和基姆薩氏染料,后者在細(xì)胞核染色中應(yīng)用廣泛。最后,單純?nèi)玖先缱系ゎ?,其染色能力取決于其是否能溶解在被染物中,由于它們大多屬于偶氮化合物,通常不溶于水,但能溶于脂肪溶劑。
在實(shí)際微生物染色實(shí)驗(yàn)中,選擇何種染料取決于實(shí)驗(yàn)條件和目標(biāo)結(jié)果,理解這些染料的特性和分類,有助于確保染色效果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
擴(kuò)展資料
微生物染色分HE染色和TC染色。 HE染色是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中最基本、使用最廣泛的技術(shù)方法。
染料分為天然染料和人工染料兩種。天然染料有胭脂蟲紅、地衣素、石蕊和蘇木素等,它們多從植物體中提取得到,其成分復(fù)雜,有些至今還未搞清楚。目前主要采用人工染料,也稱煤焦油染料,多從煤焦油中提取獲得,是苯的衍生物。多數(shù)染料為帶色的有機(jī)酸或堿類,難溶于水,而易溶于有機(jī)溶劑中。為使它們易溶于水,通常制成鹽類。
染料可按其電離后染料離子所帶電荷的性質(zhì),分為酸性染料、堿性染料、中性(復(fù)合)染料和單純?nèi)玖纤拇箢悺?標(biāo)本干燥后即進(jìn)行固定,固定的目的有三個(gè):
1)殺死微生物,固定細(xì)胞結(jié)構(gòu)。
2)保證菌體能更牢的粘附在載玻片上,防止標(biāo)本被水沖洗掉。
3)改變?nèi)玖蠈?duì)細(xì)胞的通透性,因?yàn)樗赖脑|(zhì)比活的原生質(zhì)易于染色。
固定常常利用高溫,手執(zhí)載玻片的一端(涂有標(biāo)本的遠(yuǎn)端),標(biāo)本向上,在酒精燈火焰外層盡快的來回通過3—4次,共約2—3秒鐘,并不時(shí)以載玻片背面加熱觸及皮膚,不覺過燙為宜(不超過60℃),放置待冷后,進(jìn)行染色。
以上這種固定法在微生物實(shí)驗(yàn)室中雖然應(yīng)用較多普遍,但是應(yīng)當(dāng)指出,在研究微生物細(xì)胞結(jié)構(gòu)時(shí)不適用,應(yīng)采用化學(xué)固定法。化學(xué)固定法最常用的固定劑有:酒精(95%),酒精和醚各半的混合物,丙酮,1—2%的餓酸等。餓酸能很快固定細(xì)胞但不改變其結(jié)構(gòu),故較常用。
微生物染色方法一般分為單染色法和復(fù)染色法兩種。前者用一種染料使微生物染色,但不能鑒別微生物。復(fù)染色法是用兩種或兩種以上染料,有協(xié)助鑒別微生物的作用。故亦稱鑒別染色法。常用的復(fù)染色法有革蘭氏染色法和抗酸性染色法,此外還有鑒別細(xì)胞各部分結(jié)構(gòu)的(如芽胞、鞭毛、細(xì)胞核等)特殊染色法。食品微生物檢驗(yàn)中常用的是單染色法和革蘭氏染色法。 用一種染色劑對(duì)涂片進(jìn)行染色,簡便易行,適于進(jìn)行微生物的形態(tài)觀察。在一般情況下,細(xì)菌菌體多帶負(fù)電荷,易于和帶正電荷的堿性染料結(jié)合而被染色。因此,常用堿性染料進(jìn)行單染色,如美蘭、孔雀綠、堿性復(fù)紅、結(jié)晶紫和中性紅等。若使用酸性染料,多用剛果紅、伊紅、藻紅和酸性品紅等。使用酸性染料時(shí),必須降低染液的PH值,使其呈現(xiàn)強(qiáng)酸性(低于細(xì)菌菌體等電點(diǎn)),讓菌體帶正電荷,才易于被酸性染料染色。
單染色一般要經(jīng)過涂片、固定、染色、水洗和干燥五個(gè)步驟。
染色結(jié)果依染料不同而不同:
石碳酸復(fù)紅染色液:著色快,時(shí)間短,菌體呈紅色。
美蘭染色液:著色慢,時(shí)間長,效果清晰,菌體呈藍(lán)色。
草酸銨結(jié)晶染色液:染色迅速,著色深,菌體呈紫色。 革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立。
微生物的染色方法主要分為單一染色法和復(fù)色染色法。單一染色法使用一種染料對(duì)微生物進(jìn)行染色,主要用于形態(tài)觀察,而復(fù)色染色法則結(jié)合多種染料,有助于微生物的鑒別。例如,革蘭氏染色法就能夠區(qū)分革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。食品微生物檢驗(yàn)通常采用單一染色法和革蘭氏染色法。
在單一染色法中,由于細(xì)菌通常帶有負(fù)電荷,易于與帶正電荷的堿性染料如美蘭、孔雀綠等結(jié)合,因此常使用這類染料。酸性染料如剛果紅、伊紅等,則需要在酸性環(huán)境中使用,以便細(xì)菌帶正電荷后容易被染色。這些染色法通常包括涂片、固定、染色、水洗和干燥等步驟。不同的染料會(huì)導(dǎo)致不同的染色結(jié)果,例如,石碳酸復(fù)紅使菌體呈紅色,美蘭使菌體呈藍(lán)色,草酸銨結(jié)晶染色液則使菌體呈紫色。
革蘭氏染色法由丹麥醫(yī)師Gram于1884年創(chuàng)立,是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)菌學(xué)的鑒別染色法。該法先用堿性染料結(jié)晶染色,再用碘液媒染,最后用酒精脫色。在這個(gè)過程中,根據(jù)染料是否被脫色,將細(xì)菌分為革蘭氏陽性菌(G+)和革蘭氏陰性菌(G-)。脫色后,通常使用紅色染料如堿性蕃紅進(jìn)行復(fù)染,使陽性菌保持紫色,陰性菌變?yōu)榧t色。革蘭氏陽性菌和陰性菌在化學(xué)組成和生理性質(zhì)上有顯著差異,這些差異是染色反應(yīng)的基礎(chǔ)。例如,革蘭氏陽性菌含有與碘和結(jié)晶紫結(jié)合牢固的特殊核蛋白質(zhì)鎂鹽多糖復(fù)合物,不易脫色;而陰性菌的復(fù)合物結(jié)合程度較低,吸附染料較差,容易脫色。
以上就是微生物染色染料分為的全部內(nèi)容,微生物染色過程中的染料種類和選擇是至關(guān)重要的。染料主要分為兩大類:天然染料和人工染料。天然染料,如胭脂蟲紅、地衣素、石蕊和蘇木素,源自植物,其化學(xué)結(jié)構(gòu)復(fù)雜,一些成分尚未完全解析。而人工染料,通常稱為煤焦油染料,主要來自煤焦油,是苯的衍生物,如苯胺黑和酸性復(fù)紅等。