目錄RNA為什么不能PCR 將目的基因?qū)朐思?xì)胞的方法 獲取目的基因的方法有哪三種 將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞中 氨基酸進(jìn)出細(xì)胞有哪些方式
目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法。導(dǎo)入的介質(zhì)可以是質(zhì)粒,也可以是動(dòng)物病毒侵染。
顯微注射法是利用管尖極細(xì)（0.1至0.5μm）的玻璃微量注哪如射如緩斗針，將外源基因片段直接注射到原核期胚或培養(yǎng)的細(xì)胞中，然后藉由宿主基因組序列可能發(fā)生的重組、缺失、復(fù)渣磨制或易位等現(xiàn)象而使外源基因嵌入宿主的染色體內(nèi)。
目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法。導(dǎo)入的介質(zhì)可以是質(zhì)粒知陸，也可以是動(dòng)物病毒侵染。顯微注射法是利用管尖極細(xì)（0．1至0．5μm）的玻璃微量注射針，將外源基因片段直接注射到原核期胚或培養(yǎng)的細(xì)胞中，然后藉由宿主基因組序列可能發(fā)生的重組、缺失、復(fù)制或易位等現(xiàn)象而使外源基因嵌入宿主的染色體內(nèi)。
擴(kuò)展資料
顯微注射法轉(zhuǎn)基因的方式
直接把重組過的DNA注入受精卵的原核中，也就是將從胚胎提供者的輸卵管中取得的受精卵移到倒置顯襲枯微鏡上的微量注射臺(tái)上，然后利用固定吸量管固定住，之后注射針則依序穿過zonapellucida，ocytemembrane及malepronuleusmembrane后，將DNA注入，注入時(shí)拍猛洞可以見到原核膨大。
以小鼠受精卵雄原核的顯微注射為例，顯微注射所使用的受精卵固定吸管（holdingpipette）及注射針制備很困難，除影響操作時(shí)間外，也是影響轉(zhuǎn)基因效率及基因注入后之胚胎存活及轉(zhuǎn)基因成功與否極其重要的因子。
參考資料來源：-顯微注射法
檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是：導(dǎo)入時(shí)用的運(yùn)載體上如果有抗性基困嘩因（標(biāo)記基因）,就可以通過檢測(cè)抗性基因的表達(dá)來檢測(cè),比如運(yùn)載體pbr322
就帶有抗四環(huán)素基因和抗氨卞青霉素基因羨逗
要么汪派行就等目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá)以后,然后根據(jù)特定的性狀來區(qū)分.
還有dna、mrna、蛋白質(zhì)雜交法.
合成所最終需要的蛋白質(zhì),即最終所需要的產(chǎn)品.
可通過物汪轉(zhuǎn)染的方法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；包括化學(xué)轉(zhuǎn)染罩猜仔法：1.deae-葡聚糖法，兆嫌2.磷酸鈣法，3.人工脂質(zhì)體和物理方法：①顯微注射②電穿孔③基因槍等；此外還可通過輔助載體（如病毒）將目的基因?qū)氲剿拗骷?xì)胞。
常用方法：基因工程中常用的受體細(xì)胞有大腸桿菌，枯草桿菌，土壤農(nóng)桿菌，酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。其中，對(duì)于細(xì)菌或植物細(xì)胞，常用質(zhì)粒作為載體將目的基凳肆返因?qū)爰?xì)胞內(nèi)；動(dòng)物細(xì)胞則用顯微注射的方法將目的基因?qū)雱?dòng)物受精卵的雄性原核中。
過程：用人工方法使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，主要是借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。例如，如果運(yùn)載體是質(zhì)粒，受體細(xì)胞是細(xì)菌，一般是將細(xì)菌用氯化鈣處理，以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞。目棗饑的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，就可以隨著受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制，雹遲由于細(xì)菌的繁殖速度非常快，在很短的時(shí)間內(nèi)就能夠獲得大量的目的基因。
